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- 品牌:聯(lián)祖
- 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
- 貨號:LZR4331
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-20
- 更新日期: 2025-04-18
產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR4331 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書 | 50T | LZR4331 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
根瘤菌用途: 固氮
乳桿菌屬拉丁屬名: Lactobacillus sp.
松口蘑注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
島青霉拉丁屬名: Penicillium islandicum
宛氏擬青霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
潘諾尼亞鎖霉拉丁屬名: Itersonilia pannonica
卵形巴貝斯蟲(盧氏株)拉丁屬名: ovata
枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli ETEC O25:K19
金黃色葡萄球菌拉丁屬名: aureus
產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒素A型拉丁屬名: perfringens Type A
葛氏沙雷氏菌拉丁屬名: Serratia grimesii
熒光威克酵母用途: 模式菌株
層出鐮孢菌拉丁屬名: Fusarium proliferatum
宇佐美曲霉拉丁屬名: Aspergillus usamii
魚源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒說明書英文名稱: 0.2ml
AVEN 英文名稱: 細胞死亡調(diào)節(jié)蛋白(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑) 0.1ml
Anti-Aurora B/FITC 熒光素標記極光激酶BIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
EphA2 英文名稱: 內(nèi)皮細胞受體蛋白酪酸激酶 0.1ml
核糖核蛋白抗原SSA Anti-SSA/RO 0.1ml
Anti-Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 熒光素標記磷酸化生成素受體2IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAP3K8/Tpl2 (Thr290) 磷酸化原活化蛋白激酶激酶8 規(guī)格 0.1ml
CDC37L1 英文名稱: 細胞分裂周期37樣蛋白1 0.2ml
Anti-FGFR3/CD333 成纖維細胞生長因子受體3Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
MIP-1 Gamma 小鼠巨噬細胞炎性蛋白-1γMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-factor VIII(FVIII) 第八因子相關(guān)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MRC1/CD206 巨噬細胞甘露糖受體 規(guī)格 0.2ml
VD R(Human Vitamin D Receptor) ELISA Kit 人維生素D受體 96T
STK25 英文名稱: 絲酸/蘇酸激酶25 0.2ml
EDNRA 英文名稱: 內(nèi)皮素受體A 0.1ml
孕激素誘導(dǎo)阻斷因子 Anti-PIBF 0.2ml
Anti-STAT3 /FITC 熒光素標記信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MYL6(Tyr29+Ser30) 磷酸化肌球蛋白輕鏈6 規(guī)格 0.1ml
GLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
人絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 英文名稱:Human serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit進口/分裝
人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒 英文名稱:Human serine protease,PRSS ELISA Kit特價供應(yīng)
Cyclin E 英文名稱: 周期素E 0.1ml
Anti-NKG2D/CD314 NK細胞受體2DMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
M-CSF ELISA Kit 大鼠巨噬細胞集落刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-Akt/FITC 熒光素標記抗磷酸化蛋白激酶BIgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh FBXL15 FBXL15蛋白 規(guī)格 0.2ml
PGF2 Alpha ELISA Kit 大鼠素F2α 96T
PRAK 英文名稱: p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激酶 0.2ml