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- 品牌:聯(lián)祖
- 產地:進口、國產
- 貨號:LZR3956
- 價格: ¥3800/盒
- 發(fā)布日期: 2020-11-18
- 更新日期: 2025-04-18
產地 | 進口、國產 |
品牌 | 聯(lián)祖 |
貨號 | LZR3956 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
消化鏈球菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商 | Peptostreptococcus spp. | LZR3956 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,產品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時間 | 循環(huán)數(shù) |
預變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:
(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品:
多主葡萄殼菌FTH (Ferritin, Heavy Polypeptide) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用
耐鹽枝孢TFF3 (Trefoil Factor 3, Intestinal ) ELISA Kit拉丁屬名: Cladosporium halotolerans
肉桂色鏈霉菌HPR (Haptoglobin Related Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Streptomyces cinnamonensis
土壤彎孢EP2 (Prostaglandin E Receptor 2 ) ELISA Kit 用途: 研究
維多利亞隱球酵母MUC5AC (Mucin 5 Subtype AC) ELISA Kit拉丁屬名: Cryptococcus victoriae
假單胞菌PDHβ (Pyruvate Dehydrogenase Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas libanensis
阪崎腸桿菌IL-13 (Interleukin 13) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterobacter sakazakii
多分枝毛霉LBP (Lipopolysaccharide Binding Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Mucor ramosissimus
角形小孔菌TAB (Thyroxine Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Microporus quarrei
枯草芽孢桿菌CCND1 (Cyclin-D1) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
海仙菌屬LEP (Leptin) ELISA Kit拉丁屬名: Haliea sp.
蟹味菇(白)CLC (Charcot Leyden Crystal Protein) ELISA Kit用途: 食用
異常威克漢姆酵母CCRL1 (Chemokine C-C-Motif Receptor Like Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Wickerhamomyces anomalus
烏魯木齊奇異球菌SEMA4C (Semaphorin 4C) ELISA Kit拉丁屬名: Deinococcus wulumuqiensis
圖畫大洋芽孢桿菌AXIN2 (Axis Inhibition Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Oceanobacillus picturae
消化鏈球菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒供應商Laminin Beta1 peptide 層粘連蛋白β1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-ALK/CD246 (Tyr1604) 磷酸化間變型激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Tyr245) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl 規(guī)格 0.1ml
稀釋液 10ml/100ml pH7.2
Versican 英文名稱: 蛋白聚糖Versican 0.1ml
phospho-DOK1(Tyr362) 英文名稱: 磷酸化D酪酸激酶衰減蛋白1 0.1ml
Anti-phospho-ALK/CD246 (Tyr1604) 磷酸化間變型激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
CABLES2 英文名稱: 細胞周期蛋白依賴性激酶CABLES2 0.2ml
Anti-GATA-6 GATA結合蛋白6Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SCF/MGF(Human Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit 人干細胞因子/肥大細胞生長因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GLUT1 葡萄糖轉運蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Goat IgG/APC APC標記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格 0.1ml
Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit 人α橫紋肌肌動蛋白 96T
RCBTB1 英文名稱: 鳥嘌呤核苷酸交換因子 0.2ml
Anti-SLC40A1/FPN1/FITC 熒光素標記細胞膜鐵轉運蛋白SLC40A1IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-p23 (Ser113) 磷酸化端粒酶結合蛋白P23 規(guī)格 0.1ml
Calponin 1 鈣調節(jié)蛋白-1(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
大鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Amylin ELISA Kit特價供應
大鼠胰素樣肽1(Glp-1)ELISA試劑盒英文名稱:Rat ghcagons-like pepfide 1,GLP-1 ELISA Kit進口/分裝
大鼠乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒英文名稱:Rat alcohol dehydrogenase,ADH ELISA Kit特價促銷
大鼠乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒英文名稱:Rat aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit特價供應
CHI3L1 英文名稱: 軟骨糖蛋白39 0.1ml
Anti-IGF I 樣生長因子IMulti-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
MEC/CCL28(Human mucosae associated epithelia chemokine) ELISA Kit 人粘膜相關上皮趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GFP 綠色熒光蛋白(免疫組化用)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Anti-Guinea pig IgG/APC APC標記的小鼠抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
HSP-20(Human Heat Shock Protein 20) ELISA Kit 人熱休克蛋白20 96T
RTP4 英文名稱: 受體轉運蛋白4 0.2ml