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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3834
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-17
- 更新日期： 2025-04-21
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3834 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Mycobacterium bovis | LZR3834 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
鐮刀菌屬EPHA3 (Ephrin Type A Receptor 3) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
凍土毛霉Anti-Surv (Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鞘氨盒菌GPI (Glycophosphatidylinositol) ELISA Kit拉丁屬名: Sphingopyxis pacificum
宛氏擬青霉CD99 (Cluster of Differentiation 99) ELISA Kit 拉丁屬名: Paecilomyces variotii
樺剝管孔菌PMN Elastase (Polymorphonuclear Elastase) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
砂單胞菌HO1 (Heme Oxygenase 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Arenimonas manganiresistens
耐寒短桿菌TAT (Thrombin/Antithrombin Complex) ELISA Kit拉丁屬名: Brevibacterium frigoritolerans Delaporte and Sasson
粘紅酵母C1r (Complement Component 1R) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodotorula glutinis (Fresenius) Harrison
紅球菌FN (Fibronectin) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus globerulus
白色短波單胞菌LRP (Lung Resistance-Related Protein) ELISA Kit拉丁屬名: Brevundimonas alba
梭菌MUC3 (Mucin 3) ELISA Kit拉丁屬名: septicum
燕麥鐮孢NUP62 (Nucleoporin 62kDa) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium avenaceum
短密青霉FGFBP2 (Fibroblast Growth Factor Binding Protein 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium brevicompactum
雞樅(雞菌）β-EP (Beta-Endorphin) ELISA Kit用途: 食、藥菌
枯草芽孢桿菌EphA2 (Tyrosine protein kinase receptor A2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis
牛分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格DIP2A/C21orf106 21號(hào)染色體開放閱讀框106抗體碘化木蘭花堿4H-Dibenzo[de,g]quinolinium,5,6,6a,7-tetrahydro-1,11-dihydroxy-2,10-dimethoxy-6,6-dimethyl-, iodide (1:1),(6aS)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H24NO4+.I- 分 子 量: 469.31286
MAP-9 微管相關(guān)蛋白9抗體間三聯(lián)苯1,1':3',1''-Terphenyl化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C18H14 分 子 量: 230.30376
MAP7D1/RPRC1 精氨酸/脯氨酸富含卷曲蛋白1抗體Tokinolide BSpiro[3H-3a,6-ethanoisobenzofuran-4(1H),1'(3'H)-isobenzofuran]-1,3'-dione,3-butylidene-5,6,6',7'-tetrahydro-5-propyl-, (1'S,3Z,3aS,5R,6R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C24H28O4 分 子 量: 380.47672
MKLP1 有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白樣1抗體7-甲氧基-beta-咔啉-1-丙酸7-Methoxy-b-carboline-1-propionic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
NDE1 核分布基因E同源蛋白1抗體楊芽黃素5-Hydroxy-7-methoxy-2-phenyl-4H-chromen-4-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C16H12O4 分 子 量: 268.26408
NEK9 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK9抗體4-β-羥基膽固醇4β-Hydroxy Cholesterol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C27H46O2 分 子 量: 402.65294
phospho-NEK9(Thr210) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK9抗體2-溴聯(lián)苯2-Bromobiphenyl 高端化學(xué)試劑 分 子 式: C12H9Br 分 子 量: 233.10386
