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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

黃孢紫紅菇MYL9 (Myosin Light Chain 9, Regulatory) ELISA Kit用途: 屬外生菌根菌

齊藤隱球酵母OCT (Ornithine Carbamoyl Transferase) ELISA Kit拉丁屬名: Cryptococcus saitoi

寡氧單胞菌PROS (Protein S) ELISA Kit用途: 成膜菌

蠟樣芽孢桿菌BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  cereus

金針菇F39VEGF-B (Vascular Endothelial Cell Growth Factor B) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

根瘤菌THRSP (Thyroid Hormone Responsive) ELISA Kit用途: 固氮

紅色鹽顆粒形菌NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Halogranum rubrum

籬邊粘褶菌FE (Ferritin) ELISA Kit拉丁屬名: Gloeophyllum sepiarium

松鼠葡萄球菌松鼠亞種MEC/CCL28 (Mucosae Associated Epithelia Chemokine) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

酮丁梭菌（酮丁桿菌）OTF2B (Octamer Transcription Factor 2B) ELISA Kit拉丁屬名: Clostridium acetobutylicum McCoy et al.

釀酒酵母PKD2 (Protein Kinase D2 )NELISA Kit 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae

黃綠木霉HNRPA2B1 (Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein A2/B1) ELISA Kit拉丁屬名: Trichoderma aureoviride

蘇云金芽孢桿菌GP5 (Glycoprotein V, Platelet) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus thuringiensis

蝙蝠蛾擬青霉LATS (Long Acting Thyroid Stimulator) ELISA Kit拉丁屬名: Paecilomyces hepiali

5#---3號(梨形灰包)GTEAGE (Glomerular Tissue Extract Advanced Glycosylation End Products) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
馬立克氏病病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒供應(yīng)商IQCF1  IQCF1蛋白抗體黃獨素DDIOSBULBIN-D化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C19H20O6 分 子 量: 344.3585

ISLR2  ISLR2蛋白抗體L-阿拉伯糖D-Arabinose化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C5H10O5 分 子 量: 150.1299

HPRT  次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體鴨腳樹葉堿Picrinine中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C20H22N2O3 分 子 量: 338.40028

SPTLC2  絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶2抗體萊苞迪甙ARebaudioside A中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C44H70O23 分 子 量: 967.012800000001

AKAP2  蛋白激酶A2抗體灰氈毛忍冬皂苷甲Macranthoidin A中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C59H96O27 分 子 量: 1237.38

PAPSS1  腺苷酸硫酸激酶1抗體3,4,5-三甲氧基苯甲酸3,4,5-Trimethoxybenzoic acid其它化學(xué)試劑 分 子 式: C10H12O5 分 子 量: 212.19928

PAPSS2  腺苷酸硫酸激酶2抗體胞嘧啶6-Aminopyrimidin-2(1H)-one中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C4H5N3O 分 子 量: 111.102