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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數據分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應鑒定——PCR反應條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產品：

杰丁畢赤酵母GRβ (Glucocorticoid Receptor Beta) ELISA Kit 拉丁屬名: Pichia  jadinii

球孢白僵菌CLEC2C (C-Type Lectin Domain Family 2 Member C) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

污膠鼓菌PDGF-AB (Platelet Derived Growth Factor AB) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

白色沉積物桿菌Anti-GM1 (Anti-Ganglioside M1 Antibody) ELISA Kit拉丁屬名: Sediminibacillus albus

根瘤菌PHC (Primary Hepatic Carcinoma) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

拜氏醋桿狀菌TNC (Tenascin C) ELISA Kit拉丁屬名: Acetobacterium bakii

貝倫格葡萄座腔菌梨生?；?/span>GP4 (Platelet Membrane Glycoprotein IV) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

淡紫青霉DKK2 (Dickkopf Related Protein 2) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

谷氨酸棒桿菌Ⅰ型PLTP (Phospholipid Transfer Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Corynebacterium  glutamicum

假單胞菌屬NUP85 (Nucleoporin 85kDa) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

莖點霉屬TLN (Talin) ELISA Kit拉丁屬名: Phoma sp.

黃柄雞油菌LH (Luteinizing Hormone) ELISA Kit拉丁屬名: Cantharellus xanthopus

枯草芽孢桿菌EFNA1 (Ephrin A1) ELISA Kit 拉丁屬名: Bacillus  subtilis

枯草芽孢桿菌IL-1α (Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

丁香直絲鏈霉菌CAP1 (Adenylate Cyclase Associated Protein 1) ELISA Kit拉丁屬名: Streptomyces lilacinorectus
大片吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒供應商CCDC69  卷曲螺旋結構域蛋白69抗體甲酰胺加樣緩沖液(10×)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CCDC50  卷曲螺旋結構域蛋白50抗體氫溴酸加蘭他敏galanthamine hydrobromide中藥標準品  分 子 式: C17H21NO3.HBr;C17H22BrNO3 分 子 量: 368.27

CCDC98  卷曲螺旋結構域蛋白98抗體四氫表小檗堿Tetrahydroepiberberine中藥標準品  分 子 式: C20H21NO4 分 子 量: 339.38504

CCDC47  卷曲螺旋結構域蛋白47抗體蛋白酶K溶液(Proteinase K,20mg/ml)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CCDC70  卷曲螺旋結構域蛋白70抗體Denhardt's溶液(50×)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

CCDC90A  卷曲螺旋結構域蛋白90A抗體異肥皂草苷4H-1-Benzopyran-4-one,6-b-D-glucopyranosyl-2-[4-(b-D-glucopyranosyloxy)phenyl]-5,7-dihydroxy-中藥標準品  分 子 式: C27H30O15 分 子 量: 594.52

CCDC51  卷曲螺旋結構域蛋白51抗體輪環(huán)藤堿Cycleanine中藥標準品  分 子 式: C38H42N2O6 分 子 量: 622.75