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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
蝦肝腸微胞蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3555
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-13
  • 更新日期: 2025-04-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3555
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

蝦肝腸微胞蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Enterocytozoon hepatopenaei(EHP)

LZR3555

PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

閃光須霉DHEA-S (Dehydroepiandrosterone Sulfate) ELISA Kit 拉丁屬名: Phycomyces nitens

金灰青霉LDHB (Lactate Dehydrogenase B) ELISA Kit 拉丁屬名: Penicillium aurantiogriseum

紅曲紅曲D-LDH (D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 拉丁屬名: Monascus  anka

分枝卷霉ASB (Arylsulfatase B) ELISA Kit拉丁屬名: Circinella ramosa

溶藻弧菌TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit拉丁屬名: Vibrio  alginolyticus

豇豆慢生根瘤菌FcαR/CD89 (Receptor I for the Fc Fragment of IgA) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

豬鏈球菌TMSβ4 (Thymosin Beta 4) ELISA Kit 拉丁屬名: suis

成團(tuán)泛菌PTGES2 (Prostaglandin E Synthase 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

孟氏假單胞菌NA/NE (Noradrenaline) ELISA Kit拉丁屬名: Pseudomonas  mandelii

屎腸球菌ON (Osteonectin) ELISA Kit 拉丁屬名: Enterococcus  faecium

硬桿菌TUBα3C (Tubulin Alpha 3c ) ELISA Kit 拉丁屬名: Arthrobacter     scleromae

Massilia duraCYSLTR2 (Cysteinyl Leukotriene Receptor 2) ELISA Kit 拉丁屬名: Massilia dura

宇佐美曲霉FGFR4 (Fibroblast Growth Factor Receptor 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus  usamii

中慢生華癸根瘤菌PROC (Protein C) ELISA Kit用途: 與膜莢黃芪、沙打旺共生固氮

島生坂野酵母PICP (Procollagen I C-terminal Propeptide) ELISA Kit 拉丁屬名: Bannoa hahajimensis
蝦肝腸微胞蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書NESG1/CCDC19  鼻咽上皮細(xì)胞特異性蛋白1抗體延命草素Enmein化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H26O6 分 子 量: 362.41684

FOXL2  小瞼裂綜合征蛋白BPES抗體桑根酮KSanggenon K化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C30H32O6 分 子 量: 488.571

XPC  DNA補(bǔ)充修復(fù)XPC細(xì)胞蛋白抗體鞭打繡球甙 Ab-D-Glucopyranoside,2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)ethyl 3-O-b-D-glucopyranosyl-,4-[(2E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-2-propenoate] (9CI)對照藥材 分 子 式: C31H40O16 分 子 量:

EPHA10  酪氨酸蛋白激酶受體A10抗體仙鶴草內(nèi)酯1H-2-Benzopyran-1-one,3,4-dihydro-6,8-dihydroxy-3-[2-(4-methoxyphenyl)ethyl]-, (3S)-對照藥材 分 子 式: C18H18O5 分 子 量: 314.33252

TP53I8/EI24  蛋白p53誘導(dǎo)蛋白8過氧去氫土莫酸(20xi)-3beta,16alpha-dihydroxy-*lpha,8alpha-epidioxy-24-methyllanosta-6,9(11),24(241)-trien-21-oic acid化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C31H46O6 分 子 量: 514.693

EVC2  膜蛋白EVC2抗體Tris-HCl緩沖液(1mol/L,pH7.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

BMPR1B  骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體1B抗體戈米辛D5,13-(Epoxybutanoxy)benzo[3,4]cycloocta[1,2-f][1,3]benzodioxol-18-one,5,6,7,8-tetrahydro-6,17-dihydroxy-1,2,3-trimethoxy-6,7,16,17-tetramethyl-,(5S,6S,7S,13aR,16R,17R)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C28H34O10 分 子 量: 530.56356


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